MEBRIGHT™
ウイルス不活化液2

新型コロナウイルスに対するPCR検査の普及が進む一方、検体の採取者、輸送者そして検査従事者への感染リスクが問題となってきました。特に感染性検体の輸送を行う際、検体中のウイルスの感染能力を無効にする「不活化処理」が求められています。

これまでに市販されているウイルス不活化処理液はダイレクトPCR法に対応しておりませんでした。そのため、ダイレクトPCR法のユーザーが検体輸送を行う際、検体の不活化処理を行わずに輸送が行われている現状がありました。

そこで当社はAMEDウイルス等感染症対策技術開発事業の枠組みに参画し、東京大学先端科学技術センター並びに株式会社島津製作所との共同研究として、ダイレクトPCR法で使用可能なウイルス不活化液の開発を成功させました。

ⅰ. SARS-CoV-2に対する不活化試験

培養細胞から調製したSARS-CoV-2を対象として本品のウイルス不活化能を評価しました。

ウイルス力価TCID₅₀が4.5x10⁷（/mL）のウイルス液を2倍量の本品または生理食塩水（対照品）と混合し、25℃で5分間静置しました。その後、界面活性剤をカラムで除去し、10倍から10⁸倍まで10倍ずつ段階希釈した希釈液 各40 μLを、等量のVeroE6細胞を播種した6つのwellに接種しました。4日間培養した後、ウイルス感染による細胞変性が観察されたwellを計数してウイルス力価TCID₅₀（/mL）を算出しました。その結果、以下の図に示すように、生理食塩水を用いた場合はウイルス力価が維持されていましたが、本品を用いた場合はウイルス力価が検出限界未満でした。

したがって、上記の条件でSARS-CoV-2が不活化されることを確認しました。

＊本試験は学校法人加計学園との共同研究契約に基づき、岡山理科大学 獣医学部 微生物学講座 森川茂教授が実施しました。

ⅱ. RNA安定性試験

唾液検体と本品の混合液におけるRNAの安定性を評価しました。

不活化したSARS-CoV-2を5.0×10²コピー/μLとなるように添加した唾液検体を2倍量の本品と混合し、4℃または25℃で 0、3、7日間静置した後、Ampdirect™ 2019-nCoV検出キット（株式会社島津製作所）を用いてウイルスRNAを検出しました。

図に示すように、4℃、25℃のいずれにおいても、7日間まで保管した場合の唾液検体と本品の混合液におけるRNAの安定性を確認しました。